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一文看懂polymersource試劑盒的使用規(guī)程

更新時間:2025-12-19點擊次數(shù):127
  polymersource試劑盒廣泛應(yīng)用于科研與臨床檢測,其高靈敏度也意味著對操作細節(jié)敏感,微小的偏差即可導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)曲線異常、背景升高或重復(fù)性差。為確保polymersource試劑盒結(jié)果準(zhǔn)確可靠,使用者必須嚴(yán)格遵循規(guī)范,尤其注意以下關(guān)鍵事項。
  1、嚴(yán)格控溫與平衡
  所有試劑(尤其是酶標(biāo)抗體和底物)使用前需在室溫(18-25℃)平衡30分鐘。溫度波動會顯著影響抗原-抗體結(jié)合效率及酶反應(yīng)速率,導(dǎo)致OD值漂移。
  2、避免反復(fù)凍融標(biāo)準(zhǔn)品與抗體
  標(biāo)準(zhǔn)品和檢測抗體應(yīng)按單次用量分裝,-20℃保存,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。每次取用后立即放回freezer,防止蛋白變性失活。
  3、精準(zhǔn)加樣,杜絕交叉污染
  使用經(jīng)校準(zhǔn)的移液器,配合低吸附槍頭。每加一種試劑更換新槍頭;切勿將已吸取的試劑倒回原瓶;避免槍頭觸碰孔壁或液面,防止非特異吸附。
  4、洗板到位且一致
  洗板是降低背景的關(guān)鍵。使用自動洗板機時,確保每孔注滿洗滌液(通常300-400μL),浸泡30秒后再吸干;手工洗板需重復(fù)5次以上,并在吸水紙上拍干(勿擦拭),避免殘留液體稀釋后續(xù)試劑。
  5、顯色反應(yīng)嚴(yán)控時間與避光
  TMB等顯色底物對光敏感,顯色過程需避光進行。嚴(yán)格按照說明書控制顯色時間(通常10-30分鐘),到時立即加入終止液(如2MH?SO?),否則顏色持續(xù)加深,線性喪失。
  6、標(biāo)準(zhǔn)曲線必須同步制備
  每次實驗都需新鮮配制標(biāo)準(zhǔn)品梯度,并與待測樣本同板檢測。不同批次或不同板間的標(biāo)準(zhǔn)曲線不可互換,否則定量無效。
  7、樣本預(yù)處理不可忽視
  血清/血漿樣本需充分離心(≥1500×g,10分鐘)去除顆粒;高脂或溶血樣本可能干擾檢測,必要時稀釋或過濾。組織勻漿液需離心取上清,避免細胞碎片堵塞孔底。
  8、合理設(shè)置對照組
  必須包含:空白孔(僅加緩沖液)、零標(biāo)準(zhǔn)孔、陽性/陰性對照(若提供)。這些對照用于驗證系統(tǒng)有效性、計算背景扣除及判斷實驗是否成功。
 
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