促紅細胞生成素（EPO) 是一種高度糖基化的蛋白質(zhì)，分子量約為 30,000 - 34,000 道爾頓。人EPO是一種由165個氨基酸組成的多肽，含有一個O-連接和三個N-連接的碳水化合物鏈。重組 EPO 是用于免疫分析的天然蛋白質(zhì)的良好替代品。血清 EPO 水平取決于蛋白質(zhì)的產(chǎn)生率和清除率。90% 的 EPO 是在成人腎臟的管周細胞中產(chǎn)生的，以響應(yīng)組織氧合的減少。有證據(jù)表明，這些細胞上檢測血液氧飽和度的蛋白質(zhì)是含血紅素的部分。隨著血漿的 pO2（血細胞比容的函數(shù)）降低，EPO 濃度將增加。

血清促紅細胞生成素濃度的定量可作為確定貧血或紅細胞增多癥原因的診斷輔助手段。再生障礙性貧血、溶血性貧血和缺鐵性貧血都會導(dǎo)致血清EPO升高。然而，由于腎功能衰竭和其他疾病如獲得性免疫缺陷綜合征 (AIDS) 引起的繼發(fā)性貧血患者的 EPO 水平通常低于貧血程度。這很可能是由于患病腎臟產(chǎn)生足量 EPO8 的能力受損所致。低濃度的 EPO 可能會發(fā)出腎移植排斥反應(yīng)的早期預(yù)警。EPO 還可用于監(jiān)測接受齊多夫定 (AZT) 治療的艾滋病患者。EPO 濃度增加證實與 AZT 治療相關(guān)的貧血是由于紅細胞發(fā)育不全或發(fā)育不全。

真性紅細胞增多癥或原發(fā)性紅細胞增多癥（紅細胞量增加）是由于未受刺激的紅細胞過度產(chǎn)生所致。因此，血紅蛋白的增加會導(dǎo)致 EPO 的產(chǎn)生減少，從而導(dǎo)致血清 EPO 水平低于正常水平。繼發(fā)性紅細胞增多癥也以總紅細胞量增加為特征，是對組織缺氧引起的循環(huán) EPO 水平升高的生理反應(yīng)。缺氧可能是由于肺纖維化、心血管疾病、長期暴露于高海拔、血紅蛋白異常或藥物治療等因素造成的。一些腫瘤會產(chǎn)生 EPO，在這些情況下，EPO 可用作腫瘤標志物來監(jiān)測治療效果。

物種：人類

樣品類型：  血清

樣品量：  200 uL

標準曲線范圍：  7.5 - 500 mU/mL

靈敏度：  1.2 mU/mL

檢測時長：   2.5 小時

EPO 免疫測定是一種雙位點 ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定），用于測量 EPO 的生物活性 165 個氨基酸鏈。它利用兩種不同的小鼠單克隆抗體對抗人類 EPO，對 EPO 分子上明確定義的區(qū)域具有特異性。一種針對人 EPO 的小鼠單克隆抗體被生物素化，另一種針對人 EPO 的小鼠單克隆抗體用辣根過氧化物酶 (HRP) 進行標記以進行檢測。 

在該測定中，校準品、對照品或患者樣品在鏈霉親和素包被的微孔板中與酶標抗體和生物素偶聯(lián)抗體同時孵育。在測定溫育結(jié)束時，洗滌微孔以除去未結(jié)合的成分，并將結(jié)合到固相的酶與底物四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 溫育。然后加入酸性終止溶液以終止反應(yīng)并將顏色轉(zhuǎn)化為黃色。黃色的強度與樣品中 EPO 的濃度成正比。使用從校準器獲得的結(jié)果生成吸光度單位與濃度的劑量響應(yīng)曲線。對照和患者樣品中存在的 EPO 濃度直接從該曲線確定。這些標準已經(jīng)根據(jù)世界衛(wèi)生組織 (WHO) 促紅細胞生成素國際標準進行了校準，該標準由重組 DNA 衍生的 EPO 組成。使用的 WHO 參考標準是促紅細胞生成素第一國際標準 (87/684)。