bellbrooklabs Transcreener cGAMP說明書
bellbrooklabs Transcreener® cGAMP cGAS
Transcreener cGAMP cGAS分析法直接測(cè)量由環(huán)狀GMP-AMP合酶（cGAS，C6orf150、2'3'-cGAMP合酶）產(chǎn)生的環(huán)狀GMP-AMP （cGAMP）。通過測(cè)量cGAMP的產(chǎn)量，研究人員可以有效地確定 cGAS酶的活性。該測(cè)定法提供了一個(gè)強(qiáng)大的工具，可以篩選整個(gè)化合物庫(kù)中的cGAS調(diào)節(jié)劑，以 幫助找到針對(duì)cGAS-STING途徑的新療法。
真核細(xì)胞胞質(zhì)溶膠中DNA的存在是感染或細(xì)胞損傷的指示，并且在I型干擾素（IFN）誘導(dǎo)的驅(qū)動(dòng)下引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)。cGAS是細(xì)胞質(zhì)中雙鏈DNA的非常靈敏的傳感器。DNA的結(jié)合激活了該酶，從而產(chǎn)生了*的環(huán)狀二核苷酸第二信使cGAMP，它充當(dāng)STING（干擾素基因刺激劑）受體的激動(dòng)劑，從而導(dǎo)致I型干擾素應(yīng)答。
Transcreener cGAS分析法采用易于HTS使用，混合閱讀的格式。運(yùn)行您的酶反應(yīng)，添加 Transcreener試劑，然后閱讀板。該測(cè)定與96、384和1536孔格式兼容。
當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)曲線將原始數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為cGAMP時(shí)，該測(cè)定法顯示線性。cGAS被雙鏈DNA激活，并需要ATP和GTP底物來生產(chǎn)cGAMP。
Transcreener cGAS分析法旨在以高通量格式篩選化合物庫(kù)。還可以使用該測(cè)定法進(jìn)行隨訪SAR，從而輕松確定抑制劑的效價(jià)。
該測(cè)定法準(zhǔn)確地證明了cGAS酶的特征。在GTP和ATP均存在的情況下，雙鏈DNA激活了產(chǎn)生cGAMP的酶。一個(gè)45個(gè)堿基對(duì)的ISD（干擾素刺激性DNA）和一個(gè)60個(gè)堿基對(duì)的HSV（單純皰疹病毒）DNA均可激活該酶。該測(cè)定法對(duì)cGAMP具有很高的親和力，即使存在其他核苷酸也可以檢測(cè)。
該測(cè)定顯示24小時(shí)以上的信號(hào)穩(wěn)定性。這樣的印版穩(wěn)定性對(duì)于大型的高通量篩選至關(guān)重要，由于大量樣品需要大量時(shí)間才能完成。
標(biāo)準(zhǔn)曲線包括ATP，GTP，dsDNA和cGAMP的滴定。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)讀取相同的板。
有興趣推進(jìn)您的程序，但不想內(nèi)部進(jìn)行分析嗎？我們的科學(xué)家可以提供幫助！BellBrook的科學(xué)家將利用其豐富的生物化學(xué)和酶學(xué)專業(yè)知識(shí)與您合作，并加快您的cGAS計(jì)劃。
請(qǐng)?zhí)顚懴旅娴谋砀瘛Ｎ覀儗⒀杆僮龀鲰憫?yīng)，以使對(duì)話進(jìn)展順利，并了解我們?nèi)绾翁峁椭Ｎ覀儽３质虑榉稚ⅲＣ芎蛯I(yè)。
| 供應(yīng)商 | 儀器 | |
|---|---|---|
 | TriStar²SLB 942 | |
| 密特拉拉斯LB 943 | ||
 | Cytation™5 | |
| Cytation™3 | ||
| Cytation™1 | ||
| Synergy™H1 | ||
| Synergy™2 / H4 / 4 | ||
| Synergy™HTX | ||
| Synergy™Neo 2 | ||
 | POLARstar ®歐米茄 | |
| FLUOSTAR ®歐米茄 | ||
| PHERAstar ® FSX | ||
| PHERAstar ®加/ FS | ||
| CLARIOstar ® /加 | ||
 | 分析師® GT / HT | |
| 雙子座® XPS / EM | ||
| 的SpectraMax ® M2 / M2e的 | ||
| 的SpectraMax ® M5 /的M5e / FlexStation ® 3 | ||
| 的SpectraMax ®范式 | ||
 | 的EnVision ® /的EnVision ® XCITE | |
 | 無限® M1000 / M1000Pro / Safire2™ | |
| 無限® M200 | ||
| 無限® F500 | ||
| 無限® F200 /超進(jìn)化 | ||
| Spark™10M | ||
| 零件 | 筆記 |
|---|---|
| cGAMP抗體 | 對(duì)二核苷酸cGAMP具有特異性的抗體。 |
| 示蹤劑 | 當(dāng)被置換時(shí)，取決于測(cè)定形式，可以在FP或TR-FRET中讀取熒光的變化。 |
| 停止并檢測(cè)緩沖區(qū)B，10X | 可以用于終止酶反應(yīng)以終止終點(diǎn)讀數(shù)的緩沖液。 |
| 三磷酸腺苷 | ATP可用于酶反應(yīng)和標(biāo)準(zhǔn)曲線。 |
| GTP | GTP可用于酶反應(yīng)和標(biāo)準(zhǔn)曲線。 |
| cGAMP | cGAMP可用于創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。 |
| 干擾素刺激DNA | ISD是用于激活cGAS酶的45 bp寡聚體。 |
| 零件 | 筆記 |
|---|---|
| cGAS酶 | 您可以直接通過BellBrook Labs購(gòu)買活性cGAS酶 。 |
| 酶緩沖液 | 我們經(jīng)常使用含有20mM TRIS（pH 7.5）中，5毫摩爾MgCl酶緩沖液2，0.01％的Brij-35和1％DMSO（測(cè)試化合物溶劑）。使用適合您的酶條件的緩沖液 |
| 檢測(cè)板 | 您可以直接通過BellBrook Labs購(gòu)買測(cè)定板。
FP-需要一個(gè)具有非粘合表面的全黑色印版。我們建議康寧384孔板，目錄 ＃4514。 TR-FRET-需要具有無粘合表面的全白色板。我們建議使用康寧384孔板Cat。＃4513 |
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| 貨號(hào)。 | 產(chǎn)品描述 | 價(jià)錢 |
|---|---|---|
| 3024-1K | Transcreener cGAMP cGAS FP測(cè)定法（1,000測(cè)定法，384孔） | $ 798.00 |
| 3024-10K | Transcreener cGAMP cGAS FP測(cè)定法（10,000測(cè)定法，384孔） | $ 4,615.00 |
| 3024-100K | Transcreener cGAMP cGAS FP測(cè)定（10 X 10,000測(cè)定，384孔） | $ 23,075.00 |
| 3025-1K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET測(cè)定（1,000測(cè)定，384孔） | $ 875.00 |
| 3025-10K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET測(cè)定（10,000測(cè)定，384孔） | $ 4,989.00 |
| 3025-100K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET測(cè)定（10 X 10,000測(cè)定，384孔） | $ 24,950.00 |
| 貨號(hào)。 | 產(chǎn)品描述 | 價(jià)錢 |
|---|---|---|
| 2227 | 重組cGAS酶，活性的，人的，全長(zhǎng)，10 µg | $ 399.00 |
| 2228 | 重組cGAS酶，活性的，人的，全長(zhǎng)，100 µg | $ 1,398.00 |
*當(dāng)以1.75μg/ mL（30 nM）使用時(shí)，包括用于各孔的足夠酶
| 貓。沒有。 | 產(chǎn)品描述 | 價(jià)錢 |
|---|---|---|
| 3024-1K-B | 包括Transcreener cGAS FP Assay 1K試劑盒和20 µg人類cGAS酶 | $ 1,275.00 |
| 3024-10K-B | 包括Transcreener cGAS FP Assay 10K試劑盒和200 µg人類cGAS酶 | $ 6,670.00 |
| 3025-1K-B | 包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K試劑盒和20 µg人類cGAS酶 | $ 1,345.00 |
| 3025-10K-B | 包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K試劑盒和200 µg人類cGAS酶 | $ 6,995.00 |
| 貨號(hào)。 | 產(chǎn)品描述 | 價(jià)錢 |
|---|---|---|
| 2233 | 康寧96孔黑色檢測(cè)板（＃3686），3片裝（200+檢測(cè)） | $ 40.00 |
| 2229 | 康寧384孔黑色檢測(cè)板（＃4514），3包（1,000多種檢測(cè)） | $ 45.00 |
| 2230 | 康寧384孔黑色檢測(cè)板（＃4514），30包（10,000+檢測(cè)） | $ 400.00 |
| 貨號(hào)。 | 產(chǎn)品描述 | 價(jià)錢 | |
|---|---|---|---|
| 2234 | 康寧96孔白色檢測(cè)板（＃3642），3包（200多種檢測(cè)） | $ 40.00 | |
| 2231 | 康寧384孔白色檢測(cè)板（＃4513），3包（1,000多種檢測(cè)） | $ 50.00 | |
| 2232 | 康寧384孔白色檢測(cè)板（＃4513），30包（10,000+檢測(cè)） | $ 450.00 |
