immuquest IQ479說明書

CD44抗體[156-3C11]

流式細胞儀抗CD44：抗體（156-3C11）（IQ479）系列稀釋：紫色同種型陰性對照，粉紅色1/10稀釋

目錄號：IQ479

£226.00

目標抗原

CD44

主要說明

小鼠抗CD44 [156-3C11]

目錄編號

IQ479

數(shù)量

0.1毫升

濃度

3.2mg / ml的

克隆

156-3C11

主辦

老鼠

同型

的IgG2a

免疫原

刺激人體白細胞

特異性

該抗體對CD44H分子的表位3具有特異性

物種反應(yīng)性

人類，狒狒

純化

蛋白質(zhì)A.

格式

PBS中純化的抗體+ 0.1％疊氮化na

應(yīng)用

IHC-P，流式細胞

稀釋液

宜抗體稀釋應(yīng)通過滴定確定，但作為指導(dǎo)，嘗試以1:10進行流式細胞術(shù)

參考

白細胞分型V，牛津大學(xué)出版社（1995）

數(shù)據(jù)庫

Entrez Gene：101008690狒狒

Entrez Gene：960人類

Omim：107269人類

SwissProt：P16070 Human

Unigene：502328人類

也稱為

LHR抗體; BA-1抗體; CD44抗體; CD44抗體; CD44抗原抗體; CD44分子（印度血型）抗體; CD44分子抗體; CD44_HUMAN抗體; CDw44抗體;細胞表面糖蛋白CD44抗體;硫酸軟骨素蛋白多糖8抗體;抗體CSPG8抗體; ECMR-III抗體; Epican抗體;細胞外基質(zhì)受體III抗體; GP90淋巴細胞歸巢/粘附受體抗體; HCELL抗體;造血細胞E-和L-選擇素配體抗體;硫酸乙酰肝素蛋白多糖抗體; Hermes抗原抗體;歸巢功能和印度血型系統(tǒng);抗體; HSA抗體; HUTCH-I抗體; HUTCH1抗體;透明質(zhì)酸受體抗體; IN抗體; MC56抗體; MDU2抗體; MDU3抗體; MGC10468抗體; MIC4抗體; MUTCH1抗體; PGP-1抗體; PGP -I抗體; PGP1抗體;吞噬糖蛋白1抗體;吞噬糖蛋白I抗體
 

本產(chǎn)品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。

免疫熒光方案 - 甲醛固定

   1.從Tcunit收集細胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.在室溫下在軌道振蕩器上將細胞在預(yù)熱（37℃）對甲醛中孵育12分鐘。
   4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5％Triton X-100中孵育5分鐘。
   5.準備封閉試劑，這也是抗體稀釋劑。
   6.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
   7.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   8.準備一抗（50μl/蓋玻片）和濕潤染色室。
   9.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并短暫風(fēng)干。
  10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時。在此期間準備二抗。
  11.用1x PBS洗滌細胞5次（每個燒杯更換5個燒杯/ 5個計數(shù)）
  12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時。
  13.用1x PBS洗滌細胞5次。
  14.登上達皮。

溶液（染色當天新鮮制備）。

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
    *固定液：3.5％對甲醛。

1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應(yīng)為7.4。完成體積，d.H20至25ml，加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。


免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定

   1.從TCunit收集細胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.用冷甲醇：丙酮1：1在冰上固定細胞10分鐘。
   4.制備阻斷試劑，這也是抗體的稀釋劑。
   5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細胞3次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
   6.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   7.準備一抗（50？l /蓋玻片）和濕染色室。
   8.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并風(fēng)干約7分鐘。
   9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時，在染色室中避光。在此期間準備二抗。
  10.用1x PBS洗滌細胞5次（每個燒杯更換5次燒杯/ 5次計數(shù)）
  11。在室溫下，在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時。
  12.用1x PBS洗滌細胞5次。
  13.登上達皮。

溶液（染色當天新鮮制備）

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
    *固定液：甲醇：丙酮1：1冰冷。



Western Blotting Protocol

   1.將凝膠轉(zhuǎn)移到PDVF或硝酸纖維素膜上
   2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時
   3.在洗滌緩沖液中沖洗
   4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時
   5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
   6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時
   7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
   8.檢測（例如ECL，Amersham根據(jù)制造商的說明）

洗滌緩沖液
PBS + 0.1％Tween 20 

阻斷緩沖液
洗滌緩沖液+ 5％奶粉

所用抗體的濃度取決于每種抗體，抗原的量和所用的檢測方法。通常，稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內(nèi)，但通常必須憑經(jīng)驗確定。