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當前位置:首頁技術文章prozyme PNGase F產品

prozyme PNGase F產品

更新時間:2019-02-18點擊次數:3087

prozyme PNGase F產品

PNGase F.

                      

PNGase F,肽-N- 糖苷酶F,肽-N 4 - (N- 乙酰基-β-葡糖胺基)天冬酰胺酰胺酶,通過切割N-聚糖 的內部GlcNAc和天冬酰胺(Asn)之間的切割,從而獲得完整的N-聚糖。)N-聚糖與肽連接的殘基。

通過用熱/ SDS處理使糖蛋白底物預先變性大大提高了N-聚糖去除的速率和可靠性,盡管在較高濃度下酶可以在天然條件下從糖蛋白中除去完整的聚糖。使用PNGase F進行快速(5分鐘)去糖基化是我們Gly- X樣品制備平臺的一部分。

我們提供了許多不同的配方和包裝尺寸的PNGase F:

產品/包裝尺寸

濃度

重組

EDTA

GKE-5006A  (100 mU), GKE-5006B  (200 mU) GKE-5006D  (1 U)

≥2.5U / ml

?

1mM的

GKE-5016A  (100 mU) GKE-5016B  (200 mU), GKE-5016D  (1 U)

≥2.5U / ml

?

0

GKE-5016B  (200 mU),  GKE-5016D  (1U)

≥10U / ml

?

1 mM

GKE-5020B  (200 mU) GKE-5020D  (1 U)

≥10U / ml

?

0

GKE-5003  (100 mU)

≥2.0U / ml

 

5 mM

一個單位的N-聚糖酶定義為在pH7.5和37℃下每分鐘催化1μmole變性核糖核酸酶B釋放N-連接寡糖所需的酶量。

緩沖劑和變性劑不提供1 U“D”包裝尺寸,但可根據要求提供。

歷*將EDTA包括在天然PNGase F制劑中作為穩定劑。對于GKE-5020配方,我們重新考慮了這個想法,因為客戶要求不使用EDTA的PNGase F配方。我們相信穩定性不如酶的重組形式所關注。

 

 

 

PNGase F( 肽N- 糖苷酶F) 是一個重組糖苷酶,從Elizabethkingia miricola 克隆

  • 用于測定蛋白糖基化狀態和位置
  • 可在N- 連糖蛋白的高甘露糖、雜合和復合寡糖部分內側的 N- 乙酰葡萄糖胺(GlcNAc) 和天冬酰氨殘基之間進行切割。
  • 不會去除常見植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 巖藻糖連接的寡糖。
  • 產品以10u/μl濃度提供

尺寸

500個單位

選擇目錄號: V4831

 

PNGase F, 重組糖苷酶

PNGase F(肽 N-糖苷酶 F)是一個重組糖苷酶,從 Elizabeth-kingia miricola 克隆,并在大腸桿菌中過表達獲得。PNGase F 的分子量為 36kDa,  可以在 N-連糖蛋白的高甘露糖、雜合和復合寡糖部分內側的 N- 乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間進行切割(圖1)。PNGase F 不會去除常見植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 巖藻糖連接的寡糖。

單位定義:一單位 PNGase F 指在 37℃可以 1 分鐘內催化 1nm 變性核糖核酸酶 B(RNase B)去糖基化所需 PNGase F 的量。1 Promega 單位等于 1 IUB 毫單位。

分子量:PNGase F 分子量約為 36kDa 。

物理形態:PNGase F 溶于 20mM Tris-HCl(pH 7.5,25℃),50mM NaCl和 5mM EDTA緩沖液中,濃度為10,000u/ml。

應用:

• 蛋白是否被糖基化的特征

• 確定蛋白的糖基化位點

• 聚糖結構特征

• 蛋白運輸

PNGase F對N-聚糖的切割特異性。

PNGase F對N-聚糖的切割特異性。PNGase F對N-聚糖的切割特異性。

重組PNGase F使多種底物去糖基化。

重組PNGase F使多種底物去糖基化。重組PNGase F使多種底物去糖基化。

示意圖說明了PNGase F的使用和N-糖基化的質譜分析。

示意圖說明了PNGase F的使用和N-糖基化的質譜分析。示意圖說明了PNGase F的使用和N-糖基化的質譜分析。

 

 

 

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